Comment emballer une colonne en vue de la filtration sur gel ?

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  • Voici la procédure étape par étape pour emballer une colonne en chromatographie de filtration sur gel. La colonne de verre doit d'abord être suspendue verticalement dans une position de niveau sur un support annulaire. Un tube de 1 m doit être connecté au robinet et le robinet doit être fixé à la colonne. Un tampon Tris 50 mM, pH 7,5 ou Tris doit être ajouté ensuite jusqu'à environ un tiers plein. Le G-75 ou le gel doit être agité ensuite, évitez de remuer le même. À l'aide d'un entonnoir en plastique, versez le gel dans la colonne. Ouvrir le robinet et récupérer le tampon élué après avoir attendu deux minutes. Continuez à ajouter du gel au fur et à mesure que le niveau du liquide diminue. Cela devrait continuer jusqu'à ce que la portion garnie atteigne le col jaune situé sur la colonne de verre. Laisser un tampon de 1-2 cm fermer le robinet.Un m de tube Tygon doit être connecté à ce stade avec le couvercle de la colonne et l'extrémité libre doit être suspendue dans un flacon de 250 ml contenant 200 ml de tampon Tris. Relâchez le tube après l'avoir connecté au couvercle de la colonne. Les 40 mL de tampon doivent être lavés en continu et le débit noté.

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