Как упаковать колонку для подготовки к гель-фильтрации?

1 Ответы


  • Вот пошаговая процедура упаковки колонки в гель-фильтрационной хроматографии. Сначала стеклянная колонна должна быть подвешена вертикально в горизонтальном положении на кольцевой стойке. К запорному крану должна быть подсоединена трубка длиной 1 м, а запорный кран должен быть прикреплен к колонке. Затем необходимо добавить 50 мМ Трис, pH 7,5 или Трис-буфер примерно на треть. Затем следует взболтать G-75 или гель, не перемешивая их. С помощью пластиковой воронки налейте гель в колонку. Откройте запорный кран и соберите элюированный буфер после двух минут ожидания. Продолжайте добавлять гель по мере того, как уровень жидкости понижается. Это должно продолжаться до тех пор, пока упакованная часть не достигнет желтого воротника, расположенного на стеклянной колонке. Оставьте буфер 1-2 см. Закройте кран.На этом этапе необходимо соединить один метр трубки Tygon с крышкой колонки, а свободный конец подвесить в колбе объемом 250 мл, содержащей 200 мл Трис-буфера. Освободите трубку после подсоединения ее к крышке колонки. Необходимо непрерывно промывать 40 мл буфера и записывать скорость потока.

Напишите свой ответ

Ваш ответ появится после модерации