¿Cómo se empaqueta una columna en preparación para la filtración en gel?

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  • Aquí está el procedimiento paso a paso para empacar una columna en cromatografía de filtración en gel. Primero, la columna de vidrio debe suspenderse verticalmente en una posición nivelada sobre un soporte de anillo. Se debe conectar un tubo de 1 m a la llave de paso y la llave de paso debe estar unida a la columna. A continuación, debe añadirse tampón Tris 50 mM, pH 7,5 o Tris hasta aproximadamente un tercio de su capacidad. El G-75 o el gel deben agitarse a continuación, evite revolver el mismo. Con un embudo de plástico, vierta el gel en la columna. Abra la llave de paso y recoja el tampón eluido después de esperar dos minutos. Continúe agregando gel a medida que el nivel del líquido retrocede. Esto debe continuar hasta que la porción empaquetada llegue cerca del collar amarillo situado en la columna de vidrio. Dejar un tampón de 1-2 cm cerrar la llave de paso.En esta etapa, debe conectarse un metro de tubo de Tygon con la tapa de la columna y el extremo libre debe suspenderse en un matraz de 250 ml con 200 ml de tampón Tris. Suelte el tubo después de conectarlo a la tapa de la columna. Los 40 ml de tampón deben lavarse continuamente y anotarse el caudal.

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