Oran
Gene, die für spezifische Proteine identifiziert wurden, werden geschnitten und in einem Röhrchen aus einer Quell-DNA isoliert.
Quelle können Menschen, andere Säugetiere oder Pflanzen sein. Quelle ist der genetische Spender. Das isolierte Gen wird zuerst in einen Vektor eingefügt. Vektoren sind Trägermoleküle zum Transportieren der Gene zu einem geeigneten Wirtsbakterium. Die am häufigsten verwendeten Vektoren sind Plasmide. Plasmide sind kleine zirkuläre DNA-Moleküle, die in Bakterien vorkommen. Plasmide werden in eine Lösung gegeben, die das gewünschte Gen enthält. Stellen Sie sich vor, was passiert, wenn eine Endonuklease in dieselbe Lösung eingeführt wird. Es schneidet den Plasmidring mit seinen freiliegenden klebrigen Enden auf. Die komplementären klebrigen Enden des freien Gens verbinden sich mit den offenen Enden des Plasmids durch Bildung von Wasserstoffbrückenbindungen. Der Plasmidring schließt sich wieder. Als molekularer Kleber dient ein weiteres bakterielles Enzym Ligase. Es wird die Enden versiegeln. Nun wurde das Gen ins Plasmid eingefügt/gespleißt.Plasmid wird nach Einbau/Spleißen einer anderen DNA zu einer rekombinanten DNA.
Nun werden Bakterien als Wirt für die Klonierung dieses Gens ausgewählt. Sie werden rekombinanten Plasmiden ausgesetzt. Bakterien nehmen das Plasmid auf und werden zu rekombinanten Mikroben. Die Bakterien vermehren sich zu einer großen Anzahl von Nachkommen, von denen jeder eine Kopie des Gens erhält. Es erhält das fremde Gen über mehrere Generationen hinweg. Auf diese Weise amplifiziert die Vermehrung des Klonierungswirts das Gen. Das transplantierte Gen beginnt sich im Wirt zu exprimieren. Bakterien bilden das durch das Fremdgen spezifizierte Gen.