Jennings
Southern Blotting ist eine Technik, die in der genetischen Wissenschaft verwendet wird, um das Vorhandensein eines einzelnen spezifischen Gens innerhalb eines Genoms zu bestimmen. Diese Technik wurde zuerst von Edward M. Southern entwickelt und ist daher nach ihm benannt. Während der Prozess selbst kompliziert sein kann, ist das Ziel des Southern-Blottings selbst ziemlich einfach – DNA von einem Gel, normalerweise einem Agarosegel, auf eine Membran zu übertragen, um ein bestimmtes Gen zu lokalisieren. Der gesamte Blotting-Prozess lässt sich in vier effektive Schritte unterteilen. Der erste Schritt besteht darin, die DNA mit einigen geeigneten Enzymen zu verdauen, die oft als restriktive Enzyme bezeichnet werden. Der nächste Schritt besteht darin, die verdaute DNA mit dem Verfahren der Elektrophorese aufzutrennen. Dies geschieht durch Einlegen des Gels in das oben genannte Gel. Die Trennung beinhaltet das Aussortieren von DNA-Doppelsträngen in Einzelstränge.Größere DNA-Fragmente können durch Behandlung mit HCl (erforderliche Mengen und Konzentration) in einem als Depurination bezeichneten Prozess verkleinert werden. Wenn dieser Schritt abgeschlossen ist, muss der Säuregehalt des Gels neutralisiert werden, bevor Sie zum nächsten Schritt übergehen können. Auch sonst ist die Neutralisation erforderlich. Dies liegt daran, dass die Trennung der Stränge eine Behandlung mit Natriumhydroxid erfordert, das eine basische Lösung ist (die basische Qualität der Lösung muss vor dem nächsten Schritt neutralisiert werden). Nachdem die DNA neutralisiert wurde, wird sie auf eine Membran übertragen. Auf der Membran angekommen, wird die DNA mit UV-Strahlung behandelt. Dies ist die Southern-Blotting-Technik.Der Säuregehalt muss neutralisiert werden, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren können. Auch sonst ist die Neutralisation erforderlich. Dies liegt daran, dass die Trennung der Stränge eine Behandlung mit Natriumhydroxid erfordert, das eine basische Lösung ist (die basische Qualität der Lösung muss vor dem nächsten Schritt neutralisiert werden). Nachdem die DNA neutralisiert wurde, wird sie auf eine Membran übertragen. Auf der Membran wird die DNA mit UV-Strahlung behandelt. Dies ist die Southern-Blotting-Technik.Der Säuregehalt muss neutralisiert werden, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren können. Auch sonst ist die Neutralisation erforderlich. Dies liegt daran, dass die Trennung der Stränge eine Behandlung mit Natriumhydroxid erfordert, das eine basische Lösung ist (die basische Qualität der Lösung muss vor dem nächsten Schritt neutralisiert werden). Nachdem die DNA neutralisiert wurde, wird sie auf eine Membran übertragen. Auf der Membran wird die DNA mit UV-Strahlung behandelt. Dies ist die Southern-Blotting-Technik.die DNA wird mit UV-Strahlung behandelt. Dies ist die Southern-Blotting-Technik.die DNA wird mit UV-Strahlung behandelt. Dies ist die Southern-Blotting-Technik.