Comment préparez-vous des échantillons d'ADN pour l'électrophorèse ?

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  • L'électrophorèse concerne l'action de substances chargées électriquement sous l'influence d'un champ électrique. L'électrophorèse sur gel est un dispositif de biologie moléculaire qui est crucial pour analyser l'ADN. Dans ce type d'électrophorèse, les composés chimiques et les molécules sont séparés en fonction de leur taille et de leur charge. Les molécules chargées négativement se déplacent vers l'anode positive et vice-versa. L'électrophorèse peut être utilisée pour diverses activités de l'ADN telles que le séquençage de l'ADN, les empreintes digitales de l'ADN et la génétique.

    L'étudiant qui effectue l'électrophorèse sur gel doit faire trois choses :

    • Préparer un gel d'agarose.
    • Chargez les échantillons d'ADN et exécutez le gel d'agarose.
    • Colorer l'ADN dans le gel d'agarose.

    La préparation d'un gel d'agarose consiste à faire fondre une quantité spécifique d'agarose dans un tampon TBE, à refroidir la solution et à la placer dans le plateau de coulée de gel. Le chargement des échantillons d'ADN consiste à recouvrir les gels d'une solution tampon. Avant de charger les échantillons, l'ADN doit être mélangé avec un colorant de chargement. Lors de l'exécution d'un gel d'agarose, comprenez que l'ADN, qui est chargé négativement, se déplacera plus rapidement vers l'anode positive à une tension plus élevée. Le bromure d'éthidium est utilisé pour colorer l'ADN dans le gel d'agarose car il est sensible à l'ADN et peut être vu en lumière ultraviolette.

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