Wie bereiten Sie DNA-Proben für die Elektrophorese vor?

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  • Unter Elektrophorese versteht man die Einwirkung elektrisch geladener Stoffe unter dem Einfluss eines elektrischen Feldes. Die Gelelektrophorese ist ein molekularbiologisches Gerät, das für die Analyse von DNA entscheidend ist. Bei dieser Art der Elektrophorese werden chemische Verbindungen und Moleküle anhand ihrer Größe und Ladung getrennt. Die negativ geladenen Moleküle bewegen sich zur positiven Anode und umgekehrt. Die Elektrophorese kann für verschiedene DNA-Aktivitäten wie DNA-Sequenzierung, DNA-Fingerprinting und Genetik verwendet werden.

    Der Student, der die Gelelektrophorese durchführt, muss drei Dinge tun:

    • Bereiten Sie ein Agarose-Gel vor.
    • Laden Sie DNA-Proben und lassen Sie das Agarose-Gel laufen.
    • Färben Sie die DNA im Agarosegel.

    Die Herstellung eines Agarosegels bezieht sich auf das Schmelzen einer bestimmten Menge Agarose in FSME-Puffer, das Abkühlen der Lösung und das Einbringen in die Gelgießschale. Das Laden der DNA-Proben beinhaltet das Abdecken der Gele mit einer Pufferlösung. Vor dem Laden der Proben muss die DNA mit einem Ladefarbstoff gemischt werden. Beachten Sie beim Durchlaufen eines Agarosegels, dass sich die negativ geladene DNA bei höherer Spannung schneller in Richtung der positiven Anode bewegt. Ethidiumbromid wird zum Färben der DNA im Agarose-Gel verwendet, da es empfindlich gegenüber DNA ist und im ultravioletten Licht sichtbar ist.

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